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文|娱栀
编辑|娱栀
前言
欧洲野牛是欧洲最大的陆地哺乳动物，雄性的平均体重为700公斤，雌性为450公斤，国际自然保护联盟将其地位定义为“近危”。
直到2020年，欧洲野牛特被归类为“脆弱”，在过去的20年里，它的人口在世界范围内增加了两倍，从2864年的717人增加到9111年的2020人。
人口继续增长，例如，比亚沃维耶扎森林的野牛自由生活数量从456年的2008只增加到779年初的2022只，从256年的2013只增加到Bieszczady山脉的729只。
目前波兰欧洲野牛面临的主要威胁是其在给定地区的密度过高，以及它构成的种群数量少。
遗传多样性水平低，这可能会降低生育率和存活率，这些因素还可能导致动物结核、巴氏杆菌病或皮肤病等传染病的风险增加。
波兰野牛健康问题因此波兰欧洲野牛群的健康状况多年来一直受到相当严格的审查，许多育种委员会充当野牛群保管人的咨询机构，这些委员会由国家森林地区局任命，或像比亚沃维耶扎人口一样。
由地区环境保护局任命，育种委员会由这些单位的主任下令任命，他们根据需要开会并建议特定畜群所需的行动，包括与健康和可能的动物淘汰有关的行动，但也讨论了种群管理的其他要素。
自2011年以来，波兰大多数人群一直在积极监测地方性和新出现的传染性健康威胁，大多数研究旨在流行病学分析和危险因素评估，作为健康保护策略和预防措施的一个要素。
四年多来，波兰的欧洲野牛没有结核病例记录，欧洲野牛也被研究为传播人畜共患分枝杆菌以外的疾病的潜在宿主或指示物种。
欧洲野牛保护策略的一个新挑战是自由生活的欧洲野牛中巴氏杆菌病的发病率增加，这正在取代临床上相似的结核病。
该研究的目的是积极监测波兰自由生活的欧洲野牛的结核病，由于在波兰的欧洲野牛中已经记录了结核病。
无论是圈养还是自由放养，本研究的结果可能主要有助于加快流行病学行动，以防止结核病在环境中传播。
动物和样品研究的第一阶段是检查组织以定位提示结核病的病变，在NVRI中进行的培养方法，将制备的沉积物一式三份接种在Stonebrink和Petragniani培养基上，然后在37°C±2°C下孵育，经过两周的潜伏期，每周对媒体进行一次检查。
根据制造商的方案，使用基因型分枝杆菌CM和基因型分枝杆菌MTBC测试在物种水平上鉴定该菌株，对于非结核分枝杆菌菌株，对该菌株进行了进一步的测试，以确认先前的发现并确定亚种。
测试的结果通过布鲁克生物分型系统的质谱法得到证实，为此将对应于两个全体积校准的1μL接种环的细菌生物量添加到含有50μL三氟乙酸的试管中。
将制备好的样品在室温下孵育30分钟，然后通过加入450μL无菌蒸馏水稀释，对淋巴结和肝肺段的大体检查，发现它们在生理上是正常的，例外的是来自10个尸体的组织。
它们处于厌氧细菌分解阶段，在任何检查的组织样本中，均未发现提示分枝杆菌属细菌感染的病变。
在培养研究中，从来自两个不同牛群的两种不同的欧洲野牛中获得两种品系，在一个案例中，菌株2016仅在Stonebrink培养基上获得，在第二种情况下，菌株2017，生长在Stonebrink和Petragnani基质上都可见。
多重PCR的使用使得区分结核菌株和非结核菌株成为可能，非结核分枝杆菌基因组仅包含16SrRNA基因序列，而结核分枝杆菌基因组同时包含16SrRNA基因和MPB70蛋白基因。
确认了牛支原体的存在，遗传分析显示，2016年的菌株被归类为牛分枝杆菌SB2806型，到目前为止尚未在数据库中注册。
基因型分枝杆菌CM检测的结果证实了欧洲野牛组织中存在鸟分枝杆菌，结果由MALDI-TOF证实：将获得的细胞蛋白质荷比自动与布鲁克数据库中存在的所有蛋白进行比较，从而确认了鸟分枝杆菌。
它隶属于国家森林区域局，后者监督和协调其地区的活动，该材料总共由28头欧洲野牛提供。
选择淘汰的动物健康状况不佳，前肢跛行，后炎或总体健康状况不佳，所有受试动物的病理检查均未见异常。
2016年，一人确诊结核病，这只动物没有表现出任何特定的临床症状，在求职信中只记录为状况不佳
在解剖病理学检查期间未观察到病变，包括提示结核病的病变，细菌培养和分子分析显示存在牛分枝杆菌SB2680型。
该地区于2013年在博雷卡森林的沃利斯科欧洲野牛繁殖中心报告了第一例结核病，与卡普雷分枝杆菌SB1912型相关的TB在一名男性欧洲野牛t中披露，这只动物大约四岁。
看到上眼睑轻度肿胀，这被认为是阳性结果，在解剖病理学检查期间未观察到提示结核病的病变。
该动物很可能在从波兰中部的Smardzewice牛群中被感染时已经感染：该畜群已知有结核病史，因此这个病例可能与该地区以前任何一例结核病病例无关。
自1956年以来，欧洲野牛一直居住在Borecka森林中，当时波兰科学院的科学家将该物种引入一个封闭的繁殖群。
1977年，在围栏翻新期间，一群野牛逃进了森林，一些动物继续生活在野外，博雷卡森林占地250公里2，连同邻近地区的许多奶牛牧场，沿着与森林的边界，这很可能是当地牛与欧洲野牛之间的首例种间传播病例。
2016年，在确认欧洲野牛发生结核病后，兽医官员立即下令每年对该省1/3的牛群进行结核菌素检测。
在其他波兰省，每年有1/5的牛群接受检测，2021年，距离欧洲野牛t阳性结果已经过去了五年，在此期间没有发现结核病例，因此恢复了以前的牛测试计划。
以前的研究强调了种间传播的风险，表明只要不同的动物物种共享一个牧场，就有可能发生交叉感染。
事实上分枝杆菌在阴凉环境和湿地中甚至可以持续数月由于逻辑上存在困难，且缺乏任何可信的生前诊断，野生动物中动物结核可靠诊断通常只能在尸检后进行。
尽管本研究中从扑杀动物中获得的大多数结果都是结核病阴性，但仍需要持续监测Borecka森林内欧洲野牛和其他野生动物的健康状况。
森林中栖息着小型捕食者，如狐狸、浣熊狗、獾、松貂、极猫和麝鼠，以及较大的捕食者，如狼和猞猁，它们还伴有鹿和野猪，它们都非常容易感染结核病。
在欧洲野牛中获得的鸟分枝杆菌人分枝杆菌分离株是鸟分枝杆菌复合体的成员，因此具有人畜共患意义：所有MAC成员都具有全球分布和人畜共患潜力，MAH引起鸟类结核。
也是猪、兔和野生动物感染的原因，此外尽管全球结核病发病率普遍下降，但MAH正在成为人类肺部疾病的重要病原体。
人类NTM感染的发生率增加归因于其他慢性肺部疾病的增加、免疫抑制药物的使用以及致病分枝杆菌在环境中的循环。
分枝杆菌与其他细菌不同，因为它们的细胞壁由很大比例的蜡组成，这赋予了许多外部因素的抵抗力。
此功能在消毒的情况下非常重要，最有效的杀结核制剂是含有适当浓度的过氧乙酸、过氧化氢、乙醇、2-丙醇、次氯酸钠、氯胺、甲醛或戊二醛的制剂。
鸟芽孢杆菌感染可使牛结核病的活体诊断复杂化，并导致结核菌素皮肤试验出现假阳性结果，自2009年以来，根据欧盟的要求，波兰已被公认为正式无动物结核病的国家。
即牛群的患病率低于0.1%，在自由放养的欧洲野牛中出现新的结核病疫情可能会对维持这种地位产生负面影响，此外与“森林之王”欧洲野牛有关的动物卫生法的解释也存在问题。
法规2016/429适用于波兰共和国境内，与所有其他欧盟国家的领土一样，在一些地区，欧盟制定了新的规则，对动物健康的保护进行了修改。
其中之一是将传染性动物疾病分为五类：A至E，AHL将动物结核病定义为由结核分枝杆菌引起。
两种牛分枝杆菌和卡普氏分枝杆菌引起结核病，并被强制根除，这种特别危险的细菌性疾病仅在牛科动物中被归类为B类，D类和E类。
同样重要的是要注意，这种根除适用于被列为易感染结核病的野牛属，直到2021年，动物结核病的控制由以前的《动物健康和抗击动物传染病法》中包含的波兰一般规定规定。
AHL引入了一种更普遍的，尽管非常笼统的划分，将所有动物分为饲养动物和野生动物，饲养在围栏中的欧洲野牛属于饲养动物的定义，并被视为“牛”的定义，这些规定表明，就欧盟成员国之间的流动而言。
结尾此类野牛应被视为饲养牛，因此它们受到牛的健康要求，这是很高的，如果饲养在围栏里的野牛被视为饲养的牛。
它们还必须遵守有关牛的识别和登记的要求，因此在目前的法律环境中，欧洲野牛的结核病防治似乎将取决于如何保存它们，对于饲养在围栏内的野牛，这些将由牛的规则决定，而对于野生动物，则不适用任何措施。
尽管存在一些不一致之处，但AHL的引入有助于清除根除欧洲野牛动物结核病的法律障碍，在其他传染病威胁的背景下，这一点也非常重要，然而重要的是要注意，野牛群由于其低遗传多样性而变得具有很高的疾病风险。
这使得它们容易受到大流行的影响，值得一提的是，在现行法律体系中，毫无疑问，波兰的地区兽医官员有能力控制和预防欧洲野牛的动物结核病。
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